需要是发明之母，但专利权是发明之父
二代测序对游离DNA进行测序前需要进行文库构建，传统构建流程因DNA双链的损伤导致模板利用率下降，尤其是甲基化测序建库时因需要进行亚硫酸氢盐处理，会导致大量DNA损伤，最终可进行测序模板占原始模板的比例不到10%。游离DNA往往含量极低，在检测过程中模板利用率的高低是检测准确性的保证，因此需要开发出更优、更高效的建库方法，以提高模板利用率。
优乐复生基于目前文库构建过程中所遇到的问题发明了一种对单链脱氧多核苷酸进行接头链接的方法，进而提供了一种二代测序文库构建方法——Euler Tequila建库技术，本发明的方法不但适用于正常DNA，还适用于FFPE样本、古DNA、亚硫酸氢盐处理后的DNA样本等损伤严重的样本。可将模板利用率提高至90%以上，保证损伤样本、微量样本检测准确性。
子痫前期(preeclampsia，PE)是一种常见的可严重威胁围产期母婴生命的妊娠并发症。在中国，子痫前期的发病率大致为2％-6％，是导致我国孕妇死亡的第二大原因。多项临床实验证明，在孕16周前服用低剂量的阿斯匹林可降低子痫前期的发病率。在现有技术中，已开展的大量临床试验单独或联合利用生物化学、生物物理检测及流行病统计学来预测胎盘发育不良相关的妊娠并发症的风险，但受限于其灵敏度和特异性也未能实现在较早孕周对前述疾病的风险的发病进行有效评估预测，而且目前检测方法仅适用于 25周或以上孕周人群，对于小于16孕周人群不适用。由于阿司匹林干预仅在16孕周前有效，因此对指导医生用药、预防子痫前期发生起着较为有限的作用。
本发明提供了一种用于预测与胎盘发育不良相关的妊娠并发症的风险评估方法和试剂盒，可以在早孕周(孕12-16周)对孕妇在围产期罹患妊娠期高血压综合症及其它类型胎盘源型疾病的风险进行评估和预测的方法和试剂盒。具体的，本发明涉及对子痫前期风险的评估和预测的方法和试剂盒。
膀胱尿路上皮癌的主要临床诊断方法包括膀胱镜检查、尿液脱落细胞学检查、B超、CT扫描等。膀胱内窥镜检查被视为膀胱尿路上皮癌诊断的金标准，但是该检查方法具有侵入性，且可能导致尿路感染、尿道损伤、膀胱损伤等并发症。尿液脱落细胞学检查如荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization，FISH)检测等能够对BCa进行辅助诊断，但总体敏感性和特异性均不满意，分别为50％和85％。因此，开发一种新的灵敏度更高、特异性更强、且检测周期更短的无创膀胱尿路上皮癌检测方案是非常必要的。特别地，由于膀胱尿路上皮癌具有早期症状不明显，发病后进展迅速、病理明确诊断困难等特点，增加检出率和缩短检测时间显得尤为关键。
本发明提供的用于膀胱尿路上皮癌诊断的检测方法及试剂盒具有优良的灵敏度和特异性。实验数据表明在使用尿液诊断受试者是否患有膀胱尿路上皮癌时，灵敏度为0 .889，特异性为0 .945；在使用尿液鉴别分型肌层浸润性膀胱尿路上皮癌和非肌层浸润性膀胱尿路上皮癌时，灵敏度为0 .850，特异性为1 .000。对临床上膀胱尿路上皮癌的诊断、治疗，以及后期的监测与预后评估具有很大的积极意义，为进一步进行早期诊断提供了理论依据。
α‑地贫的标准产前诊断方法是对高危夫妇进行基因分型筛查，进而采用绒毛活检术、羊膜腔穿刺 术等方法对胎盘或胎儿细胞进行产前诊断 。然而，这些常规方法是侵入式的，可能会对胎儿和孕妇造成损伤、甚至有胎儿流产的风险，同时也会增加孕妇的心理负担。有研究显示，绒毛活检术、羊膜腔穿刺术的手术流产风险分别为0 .22％、0 .11％。直至目前，α‑地贫的无创诊断面临着巨大的挑战。重型α‑地贫(‑‑/‑‑)是由于α‑珠蛋白基因的长片段缺失型导致，而无细胞DNA (Cell‑free DNA， cfDNA，也称为游离DNA) 呈高度片段化状态，因此，传统的α‑地贫基因检测方法，例如缺口聚合酶链式反应(Gap‑PCR)、多重连接探针扩增技术(MLPA)等，并不适用于α‑地贫基因的无创检测。
本发明提供了一种可用作胎儿α‑地中海贫血病的无创产前基因诊断的胎儿DNA标记物，检测方法和检测试剂盒。与现有技术相比，本公开涉及的技术方案能够更加安全、高效、准确、经济地对胎儿α‑地中海贫血病开展无创产前基因诊断。
